【摘 要】
目的:采用多種方法探究天然植物抗菌液(PAMs)對人肝癌細胞HEPG-2的殺傷及初步分子作用機理。方法:運用形態(tài)學觀察、MTT法測定PAMs對HEPG-2的抑制作用,AO/EB細胞雙染、Annexin V-FITC/PI流式細胞術(shù)檢測PAMs作用于HEPG-2細胞后細胞的凋亡情況,再通過q RT-PCR與western blot檢測HEPG-2中相關(guān)基因在m RNA水平和蛋白水平的表達量變化。最后利用劃痕實驗和transwell小室檢測PAMs對HEPG-2細胞遷移能力的抑制。結(jié)果:PAMs可以抑制和殺傷HEPG-2細胞,作用效果呈濃度和時間依賴性,且與細胞的凋亡途徑密切相關(guān)。PAMs可下調(diào)HEPG-2細胞中foxm1、survivin、bcl-2的m RNA表達水平,同時在蛋白水平下調(diào)foxm1的表達量,上調(diào)p53的表達量。除此之外,PAMs還能夠有效地抑制HEPG-2細胞的體外遷移。結(jié)論:PAMs殺傷HEPG-2細胞的途徑之一是通過下調(diào)foxm1、上調(diào)p53基因的表達量,從而抑制或減少其下游靶基因survivin和bcl-2的轉(zhuǎn)錄表達,促進細胞凋亡。本研究為基于PAMs抗癌創(chuàng)新民族醫(yī)藥的研發(fā)提供了重要的前期工作基礎(chǔ)。